犬粪包虫抗原检测试剂盒说明书

1、检测原理

犬粪包虫抗原检测试剂盒采用夹心ELISA技术。检测时，样品中的包虫抗原与微孔中包被的特异性抗体及第二步加入的包虫抗体酶标结合物特异性结合，形成复合物。间接结合在微孔内的包虫抗体酶标结合物与底物反应的显色情况反映了样品中是否含有包虫抗原。

2、适用范围 

用于快速筛查犬粪中的包虫抗原。

3、包装规格

96份/盒、192份/盒

4、产品组成

5、仪器设备

含450nm和630nm波长酶标仪；37℃恒温设备；可调单道/多道微量移液器。

6、样本准备

犬粪样品需要预先低温（-70℃以下）冷冻7天以上，以灭活虫卵。称取1克犬粪，加入1mL工作浓度样品稀释液，充分搅拌混匀，静置10分钟，再3000rpm离心10分钟，上清即为待测液。

应采集新鲜的犬粪样品进行测试。若不能及时检测，应将粪样低温冻存，防止腐败或

反复冻融。如犬粪难以溶解，应适当捣碎处理。

7、操作步骤

1.洗涤液配制：用蒸馏水或去离子水将洗涤液10×（2号液）按1:10稀释（例如，取100mL洗涤液10×，加900mL蒸馏水或去离子水混合），充分混匀即为工作浓度洗涤液。

2.样品稀释液配制：用蒸馏水或去离子水将样品稀释液2×（5号液）按1:1稀释（如取

100mL浓缩样品稀释液加100mL蒸馏水或去离子水），充分混匀即为工作浓度样品稀释液。

3.加样反应：样品孔，每孔加入100μL待测液；空白对照2孔，每孔加入样品稀释液100μL；阴性对照2孔，每孔仅加入100μL阴性对照品；阳性对照2孔，每孔仅加入100μL阳性对照品。盖好封板膜，37℃避光反应30分钟。

4.洗板：甩去孔内液体，每孔注满工作浓度洗涤液（约250μL）洗涤6次，每次均需停留1分钟；最后一次甩净，拍干。

5.加酶反应：除空白对照孔外，其余每孔加酶标结合物（1号液）100μL，盖好封板膜，37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体，如上洗板，拍干。

6.显色反应：按所需用量，临用前取等体积底物液（3号液）和显色液（4号液）充分混

匀，每孔加100μL，盖好封板膜，37℃避光反应10分钟。

7.终止反应：加终止液（6号液）50μL，以空白对照调零，用酶标仪于450nm波长（630nm

作为参比波长）读取OD值。

8、结果判定

1.Cut-off值(COV)=阴性对照平均OD值×2.1(阴性对照孔OD值＜0.15时，按0.15计)。

2.有效性判定

阴性对照孔OD值≤0.30（若大于0.30则实验无效）；

阳性对照孔OD值≥0.50（若小于0.50则实验无效）。

3.结果判定

样品OD值≥COV，判为包虫抗原阳性；

样品OD值＜COV，判为包虫抗原阴性。

9、结果解释

1.检测结果为阴性表明被检样本中没有包虫抗原，但如果出现相应临床症状，则不能排除有包虫感染。

2.检测结果为阳性表明被检样本中含有包虫抗原，应综合其它临床诊断方法进行判定。

10、注意事项

1.试剂盒各组份从冷藏环境中取出时，必须平衡至室温后，方可开封启用。未使用完的

试剂组份应及时放回2~8℃密封保存。

2.加试剂前应将试剂轻摇、混匀。

3.孵育时必须用封板膜密封板孔，封板膜不可以重复使用。

4.不同批次试剂盒的试剂组份或说明书不可混用。瓶盖每次使用后要盖紧，各瓶之间瓶

盖不可混用。

5.废弃的试剂盒及样品都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性，须小心使用。

6.本试剂盒仅供筛查，不作为确诊依据。

7.准确的诊断结果应基于必须的临床及实验室诊断之上综合得出，本公司及代理商不会对试剂盒的勿使用或误判断负责。

11、储存及有效期

储存条件：储存试剂盒于2~8℃阴凉避光干燥环境中，不要冷冻。

有效期：该产品有效期为12个月。

犬包虫抗原检测试剂盒说明书  鲁晓雄180514.doc