家畜包虫抗体检测试剂盒说明书
1、检测原理
家畜包虫抗体检测试剂盒采用夹心ELISA技术。检测时,样品中的包虫抗体与微孔中包被的特异性抗原及第二步加入的包虫抗原酶标结合物特异性结合,形成复合物。间接结合在微孔内的包虫抗原酶标结合物与底物反应的显色情况反映了样品中是否含有包虫抗体。
2、适用范围
用于快速筛查牛、羊等血清或血浆中的包虫抗体。
3、包装规格
96份/盒、192份/盒
4、产品组成
序号 | 名称 | 规格(96/192T) | 序号 | 名称 | 规格 |
1 | 包被板 | 96/192孔 | 7 | 终止液(6号液) | 15ml |
2 | 酶标结合物(1号液) | 12/22ml | 8 | 阳性对照品 | 1ml |
3 | 洗涤液10×(2号液) | 100ml | 9 | 阴性对照品 | 1ml |
4 | 底物液(3号液) | 15ml | 10 | 盖板膜 | 3/6片 |
5 | 显色液(4号液) | 15ml | 11 | 说明书 | 1份 |
6 | 样品稀释液(5号液) | 25ml |
5、仪器设备
含450nm和630nm波长酶标仪;37℃恒温设备;可调微量移液器。
6、样本准备
1.血浆样本
用抗凝管采血,或在采血管内先加入EDTA抗凝剂,将采集血液加入并缓慢摇匀,3000-5000转/分 室温离心5-10min(依采血量适量调整)。吸取上层黄色清亮液体即为血浆样本。
2.血清样本
将采集血液加入采血管内(不含抗凝剂),室温倾斜放置30分钟,待上层有黄色清亮液体析出时3000-5000转/分 室温离心5-10min(依采血量适量调整)。吸取上层黄色清亮液体即为血清样本。
样品若不能立即检测,应冷藏保存,超过24小时的,应冷冻保存。样品再次检测前需恢复至室温。
7、操作步骤
1.洗涤液配制:用蒸馏水或去离子水将洗涤液10×(2号液)按1:10稀释(例如,取100mL洗涤液10×,加900mL蒸馏水或去离子水混合),充分混匀即为工作浓度洗涤液。
2.加稀释液:每孔加样品稀释液(5号液)50μL。
3.加样反应:样品孔,每孔加入50μL待检样品;空白对照2孔,每孔加入样品稀释液50μL;阴性对照2孔,每孔仅加入50μL阴性对照品;阳性对照2孔,每孔仅加入50μL阳性对照品。盖好封板膜,37℃避光反应30分钟。
4.洗板:甩去孔内液体,每孔注满工作浓度洗涤液(约250μL)洗涤3次,每次均需停留1分钟;最后一次甩净,拍干。
5.加酶反应:除空白对照孔外,其余每孔加酶标结合物(1号液)100μL,盖好封板膜,37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体,如上洗板,拍干。
6.显色反应:按所需用量,临用前取等体积底物液(3号液)和显色液(4号液)充分混
匀,每孔加100μL,盖好封板膜,37℃避光反应10分钟。
7.终止反应:加终止液(6号液)50μL,以空白对照调零,用酶标仪于450nm波长(630nm
作为参比波长)读取OD值。
8、结果判定
1.Cut-off值(COV)=阴性对照平均OD值×2.1(阴性对照孔OD值<0.1时,按0.1计)。
2.有效性判定
阴性对照孔OD值≤0.20(若大于0.20则实验无效);
阳性对照孔OD值≥0.30(若小于0.30则实验无效)。
3.结果判定
样品OD值≥COV,判为包虫抗体阳性;
样品OD值<COV,判为包虫抗体阴性。
9、结果解释
1.检测结果为阴性表明被检样本中没有包虫抗体,但如果出现相应临床症状,则不能排除有包虫感染。
2.检测结果为阳性表明被检样本中含有包虫抗体,应综合其它临床诊断方法进行判定。
1.试剂盒各组份从冷藏环境中取出时,必须平衡至室温后,方可开封启用。未使用完的
试剂组份应及时放回2~8℃密封保存。
2.加试剂前应将试剂轻摇、混匀。
3.孵育时必须用封板膜密封板孔,封板膜不可以重复使用。
4.不同批次试剂盒的试剂组份或说明书不可混用。瓶盖每次使用后要盖紧,各瓶之间瓶
盖不可混用。
5.废弃的试剂盒及样品都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性,须小心使用。
6.本试剂盒仅供筛查,不作为确诊依据。
7.准确的诊断结果应基于必须的临床及实验室诊断之上综合得出,本公司及代理商不会对试剂盒的勿使用或误判断负责。
1.试剂盒各组份从冷藏环境中取出时,必须平衡至室温后,方可开封启用。未使用完的 试剂组份应及时放回 2~8℃密封保存。 2.加试剂前应将试剂轻摇、混匀。 3.孵育时必须用封板膜密封板孔,封板膜不可以重复使用。 4.不同批次试剂盒的试剂组份或说明书不可混用。瓶盖每次使用后要盖紧,各瓶之间瓶 盖不可混用。 |
1.试剂盒各组份从冷藏环境中取出时,必须平衡至室温后,方可开封启用。未使用完的 试剂组份应及时放回 2~8℃密封保存。 2.加试剂前应将试剂轻摇、混匀。 3.孵育时必须用封板膜密封板孔,封板膜不可以重复使用。 4.不同批次试剂盒的试剂组份或说明书不可混用。瓶盖每次使用后要盖紧,各瓶之间瓶 盖不可混用。 |
11、储存及有效期
储存条件:储存试剂盒于2~8℃阴凉避光干燥环境中,不要冷冻。
有效期:该产品有效期为12个月。
注:本站商品信息均来自于厂商,其真实性、准确性和合法性由信息拥有者(厂商)负责。本站不提供任何保证,并不承担任何法律责任。
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